Antagonismo de los receptores dopaminérgicos DA2 presentes en el tejido ovárico de la rata adulta sobre la ovulación: un estudio del estrés oxidativo en la gónada

Abstract

En el presente trabajo se analizó el papel funcional del receptor dopaminérgico tipo 2 (RDA2), inducido por la microinyección local de su antagonista específico sulpirida, administrado a través de ambas bursas ováricas (MIB), sobre las principales funciones del ovario, así como el efecto de dicho bloqueo sobre la generación de indicadores de lipoperoxidación (malondialdehído y 4-hidroxi-alquenales) y de especies reactivas al oxígeno (ROS) en la gónada. Para cumplir estos propósitos se utilizaron ratas hembra adultas de la cepa CII-ZV de ciclo estral regular de cuatro días: diestro 1 (D-1), diestro 2 (D-2), proestro (P) y estro (E). A las 13:00h del D-1, D-2, P o E, diferentes grupos de animales recibieron una MIB con 20 µL de solución de sulpirida (5µg/µL) por ovario y los grupos testigo recibieron la MIB con 20 µL del vehículo (ácido ascórbico 0.1%) en cada ovario. En todos grupos se evaluó la duración del ciclo estral y el número de ovocitos liberados en la mañana del siguiente estro vaginal observado (EVO). Como grupo control absoluto, se utilizaron animales cíclicos intactos que se sacrificaron en la mañana del estro vaginal luego de presentar al menos, tres ciclos estrales consecutivos de cuatro días. La MIB con sulpirida realizada en el D-1 retrasó la presencia del estro vaginal un día (Sulpirida (n=8): 4.9±0.1 días vs. Vehículo (n=8): 4.1±0.1 días; p<0.03, U de Mann- Whitney), lo que no ocurrió en los otros días del ciclo. No se observaron cambios en el número de ovocitos liberados ni en el peso de las gónadas y el útero entre los grupos. Los ovarios de cada grupo experimental fueron homogenizados para realizar las pruebas bioquímicas y estimar la concentración de los indicadores de lipoperoxidación y las ROS. En el grupo de animales cíclicos intactos, la producción de indicadores lipoperoxidación en el D-2 fue significativamente mayor respecto a los otros días del ciclo (D-2: 145.8±15.2 nM/mg proteína vs D-1 + P + E: 83.0±7.1 nM/mg proteína; p<0.05, U de Mann-Whitney). Comparados con un grupo de animales intactos, los indicadores de lipoperoxidación registrados en la mañana del EVO fueron significativamente menores en los grupos tratados con la sulpirida o el vehículo (Control: 101.2±9.17 nM/mg proteína vs Sulpirida: 15.97±2.90 o Vehículo: 27.31±9.80 nM/mg proteína; p<0.05, Kruskal-Wallis seguida de la prueba de comparaciones múltiples de Dunn). Las concentraciones de ROS en los ovarios de los animales con vehículo, sacrificados en la mañana del EVO, mostraron concentraciones mayores respecto los grupos de animales intactos y con sulpirida (Vehículo: 2740.1±558.5 nM/mg proteína vs Sulpirida: 216.5±20.7 o Control: 313.1±96.1 nM/mg proteína; p<0.05, Kruskal-Wallis seguida de la prueba de comparaciones múltiples de Dunn). Los resultados indican que la sulpirida prolonga la duración del ciclo estral al afectar las señales endocrinas que se generan solo en la tarde del D-1 sin modificar la cuota ovulatoria, posiblemente por su influencia en la producción de progesterona durante la fase luteal. Por otra parte, el bloqueo a los RDA2 aparentemente no modifica la producción de las ROS, pero disminuye la de indicadores de estrés oxidativo en cualquier día del ciclo estral, lo que sugiere la presencia de un sistema suficientemente eficaz para controlar los mecanismos de óxido-reducción en la gónada.