Evaluación de la citotoxicidad del dimetilsulfóxido como agente infiltrante sobre la función ovárica y el ciclo estral: efectos del antagonismo sobre el receptor dopaminérgico DA2.

Abstract

El dimetilsulfóxido (DMSO) es un disolvente orgánico con propiedades anfipáticas capaz de transportar sustancias liposolubles a través de diferentes tejidos. Existe controversia acerca de la seguridad al aplicarlo en tejidos animales ya que algunos investigadores lo consideran potencialmente tóxico. Sin embargo, resultados de nuestro laboratorio lo postulan como un vehículo seguro cuando se aplica directamente en el tejido ovárico o en la piel.

En el presente estudio, se utilizaron 68 ratas hembra adultas de la cepa CII-ZV con libre acceso al agua y al alimento, alojadas en un cubículo de 14 horas luz/10 horas oscuridad. En todos los animales se realizó el registro del ciclo estral por medio de frotis vaginales diariamente y en todos los experimentos únicamente se utilizaron animales que cumplieron al menos tres ciclos estrales consecutivos de cuatro días (diestro-1, diestro-2, proestro y estro; animales cíclicos). Entre las 13:00 y las 14:00h de cada día del ciclo estral, grupos animales cíclicos fueron sometidos a una laparotomía bilateral con el fin de exteriorizar los ovarios y realizar una microinyección con 20 µL de DMSO puro dentro de cada bursa ovárica; como grupos testigo se utilizaron animales cíclicos que recibieron 20 µL de agua destilada en los diferentes días del ciclo estral. Todos los animales con microinyección (DMSO: 20; Agua Destilada: 16) se sacrificaron en la mañana del siguiente estro vaginal observado. Como grupo control absoluto se utilizaron 8 animales cíclicos intactos que se sacrificaron en la mañana del estro vaginal. En ninguno de los casos, la microinyección del DMSO o agua destilada modificó la duración del ciclo estral (vehículos (n=40): 4.0±0.0 días vs Intactos (n=8): 4.0±0.0 días; n.s.) ni la cuota ovulatoria (vehículos (n=40): 12.7±0.3 ovocitos vs Intactos (n=8): 12.4±0.1 ovocitos; n.s.). Con base en estos resultados, se realizó otro experimento para analizar los efectos de la microinyección local del antagonista dopaminérgico sulpirida (antagonista selectivo de los receptores DA2) disuelto en DMSO puro y así, compararlos con otros hallazgos donde se emplea como vehículo de la sulpirida al ácido ascórbico 0.1%. Entre las 13:00 y las 14:00h de los diferentes días del ciclo estral, en otros grupos de animales cíclicos, se realizó una microinyección a través de las bursas ováricas con 20 µL de una solución de sulpirida (5µg/µL) diluida en DMSO puro en cada ovario. Estos animales se sacrificaron en la mañana del siguiente estro vaginal observado. Solo la microinyección con sulpirida realizada en el diestro-1 retrasó el estro vaginal 24 horas (Sulpirida (n=8): 4.8±0.2 días vs DMSO (n=24): 4.0±0.0 días y Agua Destilada (16): 4.0±0.0 días) pero no ocurrió en los otros grupos tratados con el antagonista (DMSO + Sulpirida (n=12): 4.0±0.0 días). Tampoco se observaron cambios en el número de ovocitos liberados entre los grupos. Estos resultados permiten sugerir que el DMSO administrado directamente sobre el tejido ovárico no afecta las funciones primordiales de la gónada y que su uso como agente infiltrante para el estudio de los efectos fisiológicos de fármacos insolubles podría ser recomendable.