Mecanismos celulares involucrados en la estimulación de la conducta de lordosis inducida por la administración de 17-β estradiol en la rata

Abstract

El mecanismo celular por el cual el 17-β estradiol activa la conducta de lordosis (CL) ha sido menos estudiado que el efecto sinérgico entre este esteroide y la progesterona, por lo que fue importante hacer este estudio, ya que se conoce que la rata hembra al alcanzar la madurez sexual presentan un pico de 17-β estradiol cada 4 ó 5 días, seguido por un pico de progesterona (Freeman 2005) y solo se había propuesto que esa acción sinérgica era la encargada de disparar los diferentes componentes de la conducta de estro (lordosis y proceptividad). Este pico de 17-β estradiol ha resultado ser de una gran importancia en el estudio de la CL, ya que diferentes grupos de investigación han publicado que la inyección de diferentes dosis de 17-β estradiol inducen CL Además, se ha encontrado mediante experimentos in vitro, que la adición de 17-β estradiol a cultivos de células incrementa la actividad de diferentes proteínas cinasas, como la A, G, MAPK y Src. Este hecho sugiere que el mecanismo de acción del 17-β estradiol en la inducción de la CL podría ser a través de la activación de estas proteínas cinasas, ya que estas últimas se encuentran involucradas en la inducción de la CL. En esta tesis se muestran los resultados obtenidos de cuatro experimentos en donde se probó la capacidad de diferentes dosis de 17-β estradiol administradas por vía intracerebroventricular (icv) para inducir la expresión de la CL en ratas previamente tratadas con benzoato de 17-β estradiol (BE) inyectado por vía subcutánea (sc). Además, se evaluó la participación, en el cerebro, de los receptores a estrógenos (RE), el receptor a progesterona (RP) y, sí las diferentes proteínas cinasas como; la A, G, MAPK y Src ejercen algún efecto sobre dicha conducta inducida con sólo 17-β estradiol. Se utilizaron 145 ratas hembra de la cepa SpragueDawley, las cuales en el día 0 fueron ovariectomizadas (OVX) y ocho días después se les colocó una cánula de acero inoxidable en el ventrículo lateral derecho. Ocho días después todas las hembras recibieron un pretratamiento con 5 μg de BE sc, posteriormente se formaron diferentes grupos de animales, a los que se les administró a las 39.5 ó bien a las 40 horas la inyección icv de los diferentes tratamientos experimentales de acuerdo al experimento en cuestión. En el primer experimento, se realizó una curva dosis respuesta mediante la administración de dosis subumbrales de 17-β estradiol (0.016, 0.08, 0.4, 2 ó 10 ng) a diferentes grupos de hembras. En el segundo y tercer experimento, se exploró la participación del RE y el RP a través de la inyección de los antagonistas tamoxifén ó RU486, respectivamente a diferentes grupos de hembras, 30 minutos antes de la infusión de 2 ng de 17-β estradiol. En el experimento 4, laparticipación de diferentes vías de señalización intracelular involucradas en la expresión de la CL inducida por 2 ng de 17-β estradiol en ratas previamente estrogenizadas fue estudiada a través de la administración de los siguientes compuestos; RpcAMPs (0.2 µg), KT5823 (0.12 µg), PD98059 (3 µg) y PP2 (30 µg), inhibidores de las proteínas cinasas A, G, MAPK y Src respectivamente. La evaluación de la CL se realizó a los 30, 120 y 240 minutos después de la inyección de 17-β estradiol, en arenas circulares de Plexiglás, en las que se encontraban machos sexualmente expertos. Los resultados del experimento 1 muestran que El 17-β estradiol, al ser administrado en ciertas concentraciones a ratas OVX-pretratadas con BE, indujeron la CL, por ejemplo, las dosis de 0.4 y 10 ng de 17-β estradiol inducieron clara CL, sin embargo, la dosis de 2 ng fue la que indujo una mayor respuesta a los diferentes tiempos probados. Los experimentos 2 y 3, mostraron que el RE modula la inducción de la CL inducida por 17-β estradiol, ya que la administración de 5 µg de tamoxifén disminuyó dicha conducta. Interesantemente, el RP también participa en la inducción de la CL por 17-β estradiol, ya que la infusión de 5 µg de RU486 también disminuyó la lordosis. Finalmente, los datos del experimento 4 muestran que la participación de las proteínas cinasas A y G son reguladoras importantes en la inducción de la CL inducida por 17-β estradiol, ya que se encontró que la inyección de 2 µg de RpcAMPs o de 0.12 µg de KT5823 (inhibidores de las cinasas A y G respectivamente) disminuyeron el despliegue de esta conducta inducida por 17-β estradiol. Los resultados también muestran que la MAPK se encuentra involucrada en la activación de la CL por 17-β estradiol, ya que la inyección de 3.3 µg de PD98059 disminuyó la lordosis inducida por 17-β estradiol a los tres tiempos probados. Por último, encontramos que la infusión de 30 µg de PP2 redujo la CL a los diferentes tiempos probados. Este hecho indica que la cinasa Src participa en la expresión de la CL. Con base a las evidencias obtenidas en el presente trabajo, se puede concluir que el 17-β estradiol induce CL en el modelo de la rata OVX-pretratada con BE y, para ello utiliza diferentes receptores, como los RE y el RP, así como diversas proteínas cinasas, por lo que su papel en el sistema nervioso central es muy complejo debido a la interacción y la convergencia entre diferentes vías de señalización intracelular y de las moléculas implicadas en las vías, las cuales podrían actuar como mecanismos reforzadores para alcanzar la integración neuroendocrina requerida para la expresión de la CL en la rata.