Modelo de distensión vaginal en rata: disfunciones urinarias en animales no anestesiados y tratamiento con estimulación eléctrica

Abstract

El parto vaginal está relacionado con la aparición de patologías urinarias, de las que se desconocen sus mecanismos fisiopatológicos. Para conocer el daño causado por el parto sobre el aparato urogenital (AUG) y su inervación, se ha desarrollado el modelo de distensión vaginal (DV) en ratas. El objetivo general del presente estudio fue determinar en ratas anestesiadas el efecto de la DV sobre el AUG y su inervación, y en ratas no anestesiadas, el efecto de la DV sobre las características de la conducta de micción y la actividad refleja del esfínter externo de la uretra (EEU), así como el efecto de la estimulación eléctrica transcutánea (EET) del nervio dorsal del clítoris (NDC) sobre la recuperación funcional del tracto urinario inferior en ratas con DV. Los objetivos específicos fueron: 1) Determinar el efecto de la DV sobre el AUG y su inervación de la rata, 2) Determinar si la DV induce signos conductuales de disfunciones urinarias y lesión nerviosa a corto plazo, 3) Establecer si la DV modifica los parámetros urinarios a corto y mediano plazo, 4) Precisar el tiempo de recuperación post-DV de la función urinaria en ratas conscientes y la actividad eléctrica del NDC y de los reflejos del EEU (clitoroEEU y vesico-EEU) en ratas anestesiadas, y 5) Comprobar si la estimulación transcutánea del NDC facilita la recuperación funcional del tracto urinario inferior en ratas con DV. Para ello, empleamos ratas hembra adultas nulíparas de la cepa Wistar (250 - 300 g), las cuales fueron asignadas para someterse a 4 h de DV o procedimiento sham de DV (SH DV). En los animales con DV, se insertó un catéter Foley del número 10 en la vagina por un periodo de 4 h, inflado con 4 ml de agua. En los animales SH DV el catéter fue insertado en la vagina, pero no fue inflado. Los animales con DV o SH DV fueron asignados aleatoriamente a tres experimentos. En el experimento 1, se determinaron los cambios estructurales y funcionales del tracto urinario inferior en animales anestesiados inmediato a la DV, mediante estudios de anatomía gruesa del AUG y su inervación, electrofisiología del NDC e histología de la vejiga urinaria y ganglio pélvico mayor (GPM). En el experimento 2, se determinó el efecto de la DV sobre la conducta de micción y la actividad del EEU mediante técnicas conductuales y electrofisiológicas. En el experimento 3, se determinó el efecto de la EET del NDC sobre la conducta de micción y parámetros urinarios en animales con DV. Se encontró que la DV incrementó significativamente el ancho de la vagina distal, la longitud de la rama motora del plexo lumbosacro, del NDC y de los nervios vesicales (p<0.05), y disminuyó la amplitud y frecuencia de la actividad eléctricavi del NDC (p<0.05). La DV ocluyó a la uretra e indujo retención urinaria, hematomas y disminuyó significativamente el grosor del epitelio y del músculo liso de la vejiga urinaria, en comparación con los animales SH DV (p<0.05). La DV no modificó significativamente el área del GPM ni de sus neuronas (p>0.05). En el día 3 post-DV, el 100% de los animales presentaron goteo de orina asociado a conductas que implicaron esfuerzo como erguirse en dos patas para alcanzar el alimento, y durante el estornudo y el rascado. En ese mismo lapso, la frecuencia de expulsiones de orina disminuyó, y el intervalo y la duración de las expulsiones incrementó significativamente vs los animales SH DV (p<0.01). El goteo de orina desapareció en el día 13 post-DV en la fase de oscuridad y en el día 11 post-DV en la fase de luz. En los animales SH DV no se presentó goteo ni hubo diferencias significativas en los parámetros urinarios en ningún día de registro (p>0.05). La amplitud de la actividad del NDC se recuperó en alrededor de un 90% en el día 3 post-DV. El EEU respondió consistentemente a la estimulación de la vaina clitoral (amplitud, 54.2 ± 6 µV; frecuencia, 255 ± 25 Hz) y a la vejiga urinaria (amplitud, 87.4 ± 11 µV; frecuencia, 344 ± 50 Hz) en los animales SH DV. La respuesta del EEU en los animales SH DV no varió a lo largo de los días (p>0.05) y su amplitud fue considerada como 100 % y fue comparada con la amplitud de los animales con DV. La actividad refleja del EEU y su actividad fásica durante los cistometrogramas fueron abolidos inmediatamente y en el día 3 postDV. La actividad refleja se recuperó en ~26% en el día 6 post-DV durante la estimulación de la vaina clitoral y en ~16% durante la estimulación vesical y al 100% en el día 12 post-DV. La DV abolió las oscilaciones de alta frecuencia durante la expulsión de orina en los cistometrogramas y disminuyó significativamente la eficiencia vesical (p<0.05) en los primeros 6 días post-DV. El número de gotas disminuyó significativamente en el grupo DV con EET en comparación con los grupos DV y DV con SH EET en el día 5 post-DV (p<0.01). Se concluye que la DV lesiona la estructura e inervación del AUG a corto plazo, induce signos conductuales de incontinencia urinaria de esfuerzo y abole temporalmente la actividad EMG del EEU. El sistema neuromuscular del EEU y la continencia urinaria se recuperan gradualmente a partir de la primera semana post-DV. La estimulación transcutánea del nervio dorsal del clítoris facilita la recuperación de la continencia urinaria en ratas con DV. Los resultados del presente estudio nos ayudarán a conocer más sobre los mecanismos de la incontinencia urinaria postparto y a diseñar nuevas terapias no invasivas para el tratamiento de esta patología.